Lepidochelys olivacea (Eschscholtz, 1829) : identificação e prevalência da helmintofauna de tartarugas-oliva encontradas no estado de Sergipe, Brasil

Dissertação de Mestrado Integrado em Medicina Veterinária, área científica de Sanidade AnimalA tartaruga-oliva – Lepidochelys olivacea (Eschscholtz, 1829) (Testudines: Cheloniidae) é a segunda mais pequena das sete espécies de tartarugas marinhas. Todas elas estão ameaçadas e doenças como as provocadas por parasitas foram indicadas como uma das causas de morbilidade. Mesmo assim, a helmintofauna desta tartaruga e o seu impacto estão pouco estudados, especialmente no Brasil, onde existem apenas três estudos neste sentido. Assim, o objetivo deste trabalho foi reportar as espécies parasitárias presentes e a sua prevalência, abundância média e intensidade média em tartarugas-oliva encontradas ao longo da costa da bacia de Sergipe-Alagoas, na região Nordeste do Brasil. Das 92 tartarugas às quais foi efetuada a necrópsia, 36 (39%) estavam parasitadas. Foram encontrados 280 helmintes distribuídos por 5 espécies parasitárias, pertencentes a 4 famílias: Gorgoridae, Anisakidae, Kathlaniidae e Ozobranchidae. Este estudo assinalou Sulcascaris sulcata e Tonaudia freitasi como primeiros registos publicados em L. olivacea. Os resultados desta investigação indicaram que os animais analisados se alimentaram em zonas oceânicas não partilhada com outras populações de tartarugas-oliva durante a maior parte da sua vida e que apesar de ser uma espécie omnívora, esta população apresenta hábitos alimentares maioritariamente carnívoros. Para além de fornecer informações importantes e novos dados sobre a fauna parasitária da população de tartarugas-oliva de Sergipe, sinalizámos ainda as principais causas de morte destes quelónios nesta zona geográficaABSTRACT - Lepidochelys olivacea: survey and prevalence of the helminth fauna of olive ridley turtles found in the state of Sergipe, Brazil - The olive-ridley turtle - Lepidochelys olivacea (Eschscholtz, 1829) (Testudines: Cheloniidae) is the second smaller of the seven sea turtle species. All of them are endangered and diseases such as parasitological ones are indicated as one of the causes for morbidity. However, the helminth fauna of this turtle and its impact are poorly studied, especially in Brazil, where there are only three reports of parasites in olive-ridley turtles. Therefore, the objective of this study was to report the present parasite species, their prevalence, mean abundance and mean intensity in olive ridley turtles that occured along the coast of the Sergipe-Alagoas basin, in the Northeastern region of Brazil. Of the 92 turtles necropsied, 36 (39%) were parasitized. Two hundred eighty helminths were found distributed across 5 parasitic species, belonging to 4 families: Gorgoridae, Anisakidae, Kathlaniidae and Ozobranchidae. This study highlighted Sulcascaris sulcata and Tonaudia freitasi as the first published occurrences in L. olivacea. The results of this research indicated that the animals studied fed in oceanic areas not shared with other olive turtle populations for most of their lives and that, despite being an omnivorous species, this population has mainly carnivorous eating habits. In addition to providing important information and new data on the helminth fauna of the population of olive ridley turtles in Sergipe, it also highlights the main causes of death of these chelonians in this geographical areaN/

Avaliação do peso vivo em bovinos da raça Mertolenga por processamento de imagens de alta-resolução obtidas por drone

Mestrado em Engenharia Zootécnica / Instituto Superior de Agronomia / Faculdade de Medicina Veterinária. Universidade de LisboaA determinação da condição corporal e do peso vivo em bovinos de carne é essencial para acompanhar o seu desenvolvimento, determinar a fase do ciclo produtivo em que o animal se encontra e tomar decisões produtivas. Contudo, o método de pesagem em balanças e da análise visual e determinação do BCS- Body Condition Score apresenta limitações, nomeadamente, ao nível do bem-estar animal e da logística da exploração. Tendo estes fatores em conta, este estudo pretende avaliar a utilidade do uso de imagens de alta-resolução obtidas por drones para determinação do peso vivo em bovinos Mertolengos. O estudo divide-se, então, em duas experiências tendo em conta diferentes grupos-alvo de animais. A primeira experiência divide-se em duas partes. A primeira parte consistiu em tirar fotografias de um plano superior, utilizando uma máquina fotográfica estática, a uma amostra de 120 vacas Mertolengas no momento em que estão na balança da manga. O valor do peso vivo apresentado na balança também foi registado. As imagens obtidas foram inseridas no software Image J e, através da determinação das medidas comprimento do animal, largura da garupa, largura do peito e largura abdominal, obteve-se um modelo estatístico de previsão do peso vivo. A segunda parte da experiência consistiu na utilização de um drone equipado com uma câmara. Foram obtidas imagens aéreas de todos os animais e o procedimento da primeira parte da experiência repetiu-se. A segunda experiência tem em conta o grupo-alvo dos novilhos Mertolengos em engorda. Obtiveram-se imagens, tanto estáticas como aéreas, de uma amostra de 100 animais e o procedimento foi igual ao anteriormente descrito. Com este estudo, espera-se que o modelo de previsão do peso vivo estime este indicador zootécnico com um erro que permita o uso da técnica nas decisões produtivas a tomarN/

Reenactment : entre arquivo e criação

Este trabalho propõe um estudo de três casos práticos de performances reenactment: Freeing My Hair (2021) e Freeing COVID19 Memories (2021), dois reenactments realizados por Nathalie Ward a partir da documentação das performances Art Must Be Beautiful, Artist Must Be Beautiful (1975) e Freeing the Memory (1975), trabalhos da artista Marina Abramovic, bem como o reenactment Action Pants: Genital Panic (2005), realizado por Abramovic com base na documentação da obra de VALIE EXPORT, Aktionshose: Genitalpanik (1969). A investigação dos casos implica um pensamento dos arquivos como objeto da prática criativa nas artes performativas, pelo emprego de múltiplas ativações e reativações das documentações, tendo em conta as singularidades do corpo de cada performer enquanto intérprete e transcriador da obra que se propõe reativar. Nos cruzamentos e nas dobragens de tempos, espaços, obras e performers, os reenactments promovem retornos criativos, resgatando um passado complexo que, fantasmagoricamente, é reproduzido, mas nunca exatamente da mesma maneira. Talvez possamos assim, caso a caso, ir de encontro à presença de um passado fantasma em constante diferenciação, estabelecendo, pela via da repetição crítica, um diálogo generativo entre tempos, afetos e modos de criar.This work proposes a study of three practical cases of reenactment performances: Freeing My Hair (2021) and Freeing COVID19 Memories (2021), carried out by Nathalie Ward, based on the documentation of the performances Art Must Be Beautiful, Artist Must Be Beautiful (1975) and Freeing the Memory (1975), works by performance artist Marina Abramovic, as well as the reenactment Action Pants: Genital Panic (2005), recreated by Abramovic based on the documentation of Aktionshose: Genitalpanik (1969), a work by VALIE EXPORT. The investigation of the cases entails a reflection on the archives as an object of creative practice in the performing arts, through the use of multiple activations and reactivations of documentation, taking into account the singularities of the body of each performer as interpreter and transcreator of the work she intends to reactivate. At the intersections and folds of times, spaces, works and performers, reenactments promote creative returns, rescuing a complex past that may be ghostly reproduced, yet never in the same way. Case by case, we will perhaps be able to encounter the presence of a ghostly past in permanent differentiation, establishing, by way of critical repetition, a generative dialogue between times, affects, and modes of creating

Smart hybrid compounds to target the respiratory electron transport chain of mycobacterium tuberculosis

Tese de mestrado, Química Medicinal e Biofarmacêutica, 2022, Universidade de Lisboa, Faculdade de Farmácia.A tuberculose, apesar de ser uma doença evitável e curável, mantém-se como uma epidemia global. Estima-se que em 2021, a tuberculose tenha sido a décima terceira maior causa de morte global e a segunda maior causa de morte induzida por um agente infecioso e que determinou, aproximadamente, 1,6 milhões de mortes. No mesmo ano, 10,6 milhões de pessoas terão contraído a doença e estimativas recentes indicam que um quarto da população mundial está infetado com o Mycobacterium tuberculosis (Mtb), o seu agente etiológico. O Mtb é um agente patogénico humano obrigatório, com várias características distintivas que o tornam um agente infecioso de excelência. Esta bactéria aproveita a resposta imunitária do hospedeiro para aumentar o grau de transmissão. Para além disso, possuí um arsenal metabólico extenso capaz de metabolizar os xenobióticos e uma parede celular única, com um elevado número de bombas de efluxo, que lhe confere uma alta impermeabilidade, permitindo-lhe adaptar-se às múltiplas pressões ambientais criadas pelo hospedeiro, adquirindo assim uma elevada resistência natural a fármacos. Por fim, esta micobactéria possui uma capacidade única de permanecer no hospedeiro num estado latente, caracterizado por uma fisiologia e metabolismo distinto, crescimento reduzido, tolerância a fármacos aumentada, e uma capacidade de não se deixar detetar pelo sistema imunitário. Um regime terapêutico anti-tubercular tem como objetivo diminuir a severidade da doença, evitar reincidências e o desenvolvimento de resistência, e para tal, necessita eliminar todas as populações de bacilos do hospedeiro. Devido às características próprias das bactérias latentes, os regimes terapêuticos anti-tuberculares têm durações bastante prolongadas e características de polimedicação, apresentando por isso efeitos adversos cumulativos. Consequentemente, os regimes terapêuticos anti-tuberculares têm baixa adesão e tolerância por parte dos doentes, podendo resultar na emergência de tuberculose resistente a fármacos, que está associada a uma maior letalidade, e a um sucesso terapêutico inferior. Desta forma, o desenvolvimento de um regime terapêutico curto, potente, e eficiente em todas as formas de infeção é uma prioridade no controlo da tuberculose. Para tal, é essencial desenvolver novos fármacos que sejam eficientes, seguros, e bem-tolerados, e que preferencialmente atuem por novos mecanismos de ação, de forma a evitar a emergência de resistência. Esta premência não foi considerada nos últimos anos, sendo que apenas três fármacos anti-tuberculares (bedaquilina, delamanida e pretomanida) foram aprovados nos últimos quarenta anos, todos com efeitos secundários que comprometem a sua utilização prolongada. Assim, é crucial investir na descoberta e desenvolvimento de novos fármacos ativos contra a tuberculose latente e resistente, preferencialmente com novos mecanismos de ação e alvos diferentes. A cadeia de transporte de eletrões do Mtb surgiu recentemente como um alvo promissor para novos fármacos anti-tuberculares. Atualmente, cerca de 30% dos novos fármacos em ensaios clínicos têm como alvo um elemento da cadeia de transporte de eletrões, e cerca de 65% dos regimes farmacológicos em ensaios clínicos de fase III incluem um fármaco que inibe a cadeia de transporte de eletrões. Como ambas as formas bacterianas, latentes e replicantes, requerem um fornecimento contínuo de ATP, o metabolismo energético é um alvo apelativo, já que a sua inibição e consequente disrupção do fornecimento de ATP permite eliminar eficientemente as populações replicantes e latentes, e consequentemente, diminuir a duração dos regimes terapêuticos e a emergência de resistência. Este projeto inclui a síntese e caracterização de uma pequena biblioteca de ferramentas farmacológicas híbridas, capazes de inibir o citocromo bc1-aa3, a oxidase principal do Mtb, e, em simultâneo, o citocromo bd, uma oxidase alternativa que o bacilo utiliza em situações de hipoxia. Deste modo, pretende-se que estes compostos consigam inibir eficientemente a produção de ATP, e eliminar ambas as populações bacterianas replicantes e latentes. Os compostos híbridos têm uma estrutura comum, com um esqueleto de pirroloquinolona, provavelmente capaz de inibir o citocromo bc1-aa3 uma vez que é inibidor do citocromo bc1 do Plasmodium falciparum, uma proteína com alta homologia com o citocromo bc1-aa3 do Mtb; e um esqueleto de nitrofurano, que podendo ser reduzido in vivo pelas nitroreductases do Mtb, liberta óxido nítrico capaz de inibir o citocromo bd. As duas estruturas serão ligadas por um braço de ligação, que será a porção variável da biblioteca de compostos. Os compostos foram sintetizados por uma estratégia de síntese divergente, iniciada com a síntese do esqueleto da pirroloquinolona, com rendimentos elevados. De seguida, vários braços de ligação foram acoplados, com rendimentos moderados. Quando necessário, foi efetuada uma redução das funções químicas do braço de ligação (grupos nitro e nitrilo), por forma a garantir a presença de um grupo amina livre. Por fim, o esqueleto de nitrofurano foi acoplado, com rendimentos baixos, através de dois tipos de ligação: ligações amida (7a – 7d) e ligações imina (8a – 8c). Todos os compostos foram obtidos puros, exceto o composto 7d, cujas tentativas de purificação não foram bem sucedidas. Na síntese do composto 7c, isolou-se um produto de degradação – uma nitrofuranilamida (composto 7c’) – que foi caracterizado. Como o composto 7c foi somente obtido puro posteriormente, por restrições temporais não foram efetuados os ensaios subsequentes para este composto. A solubilidade aquosa dos compostos foi determinada por HPLC para os compostos 7c’ e 8c. Este ensaio não foi efetuado com os restantes compostos ((7a), (7b), (8a) e (8b)) por se ter verificado que tinham sofrido degradação extensiva. Ambos os compostos 7c’ e 8c demonstraram ter boa solubilidade aquosa, que juntamente com as propriedades físico-químicas previstas indicam que estes compostos, provavelmente, terão uma boa biodisponibilidade oral. Também se avaliou a estabilidade química (em tampão PBS), em plasma, e metabólica (em microssomas de ratinho), por HPLC para os compostos 7c’ e 8c. Ambos demonstraram ter um bom perfil farmacocinético, sendo que o composto 7c’ demonstrou ser mais estável que o composto 8c nos três meios testados. Comparando a estabilidade do composto 7c’ com outros compostos híbridos, nenhuma correlação foi identificada entre a ausência do esqueleto da pirroloquinolona e uma melhoria no perfil farmacocinético. A atividade anti-micobacteriana dos compostos 7c’, 8c, e de alguns intermediários foi testada contra duas estirpes de M. tuberculosis (uma estirpe nativa, H37Rv, e uma estirpe mutante, cydKO). Os resultados estão de acordo com o mecanismo de ação proposto em que os compostos híbridos têm como alvos ambos os citocromos, bc1-aa3 e bd, e a necessidade do grupo nitro ser substituinte num ciclo heteroaromático. O composto 8c apresentou atividade anti-micobacteriana com valores de MIC na gama micromolar, demonstrando que estes compostos híbridos são agentes anti-tuberculares promissores. O composto 7c’ foi o composto mais ativo, apresentando atividade anti-micobacteriana com valores de MIC na gama sub-micromolar, podendo indicar um mecanismo de ação distinto, uma vez que esta molécula não contém a subunidade pirroloquinolona. A toxicidade dos compostos 7c’ e 8c, tal como do percursor 6c, foi testada contra a linha celular HEK293. Os compostos 7c’ e 6c não apresentaram citotoxicidade, enquanto o composto 8c apresentou citotoxicidade superior, apesar de demonstrar alguma seletividade para as células bacterianas. Deste modo, os próximos passos deste projeto incluem a realização de ensaios de atividade dos compostos 7c’ e 8c em outras bactérias, de forma a avaliar a seletividade destes compostos; a avaliação biológica e farmacocinética dos restantes compostos híbridos; e o aumento da biblioteca de compostos híbridos.While tuberculosis (TB) is curable and preventable, it continues to be a global epidemic, with a quarter of the world’s population estimated to be infected with Mycobacterium tuberculosis (Mtb), its causative agent. Global TB control has been hampered by multiple factors, such as the emergence of drug-resistant tuberculosis and an inefficient targeting of latency. The discovery of effective, safe, and compliance-friendly antitubercular (anti-TB) drugs remains a largely unmet medical need in the last 40 years. Although three drugs (bedaquiline, delamanid, and pretomanid) were recently approved, their displayed side-effects undermine widespread use. Therefore, new drugs active against drug-resistant and latent TB are urgently needed. The mycobacterial electron transport chain (ETC) has emerged recently as an interesting target for novel anti-TB drugs. As both replicant and latent bacteria require a sustained supply of ATP, it is believed that the inhibition of the ETC is an effective strategy to eliminate latent populations and therefore improve TB control. This project includes the synthesis and characterization of a small library of hybrid pharmacological tools that combine a structural feature designed to target cytochrome-bc1-aa3 with a nitric oxide releasing group, capable of inhibiting cytochrome bd. These tools thus offer the potential to block two key components of mycobacterial respiration. In this thesis, the synthesis and structural characterization of a small library of hybrid compounds are presented. Compound aqueous solubility and stability was evaluated by HPLC, the antimycobacterial activity was tested against Mtb H37Rv and Mtb cydKO, and the toxicity was tested in HEK293 cell lines. The hybrid compounds’ proposed mechanism of action was corroborated by the activity assays and compound 8c presented itself as a promising anti-TB agent. Additionally, a nitrofuranylamide (7c’) was isolated and presented itself has a very interesting lead molecule for anti-TB therapy, with sub-micromolar activity, no cytotoxicity, and a good pharmacokinetic and physicochemical profile.Research Institute for Medicines (iMed.ULisboa), Faculty of Pharmacy, Universidade de Lisboa

Contagem total de eosinófilos como fator preditivo de ocorrência de deiscências anastomóticas em cirurgia de cólon e reto

Trabalho Final do Curso de Mestrado Integrado em Medicina, Faculdade de Medicina, Universidade de Lisboa, 2022As deiscências anastomóticas são uma das principais complicações da cirurgia do cólon e reto (CCR), associadas a maior morbimortalidade e a maior tempo de estadia no hospital. Por esta razão, o diagnóstico destas complicações deverá ocorrer o mais cedo possível, de forma a evitar o pior desfecho. Os parâmetros inflamatórios têm sido utilizados na monitorização do pós-operatório de diversas intervenções cirúrgicas, como a CCR. É com recurso a estes parâmetros que se têm detetado mais precocemente um enorme número de complicações e, por isso, diminuído mortes e comorbilidades associadas a esta cirurgia. A contagem de eosinófilos é um dos parâmetros inflamatórios menos estudados na literatura, no que concerne ao trato gastrointestinal (TGI). Contudo, é evidente um interesse crescente pelo estudo deste parâmetro, havendo já resultados promissores noutras patologias gastrointestinais. Pretende-se com este estudo rever a contagem total de eosinófilos pós-operatória num grupo aleatório de doentes submetidos a CCR e de que forma esta contagem poderá ser preditiva de maior risco de ocorrência de deiscências anastomóticas. Para tal, foram necessárias as autorizações da Comissão de Ética e do Conselho de Administração do Centro Hospitalar Universitário de Lisboa Central (CHLUC), bem como recolha e construção de uma base de dados.Anastomotic leakage is one of the main complications of colon and rectal surgery (CRC), associated with higher morbidity and mortality and longer hospital stay. For this reason, the diagnosis of these complications should occur as early as possible, in order to avoid the worst outcome. Inflammatory markers have been used to monitor the postoperative period of several surgical interventions, such as CRC. It is in the using of these parameters that a huge number of complications have been detected earlier and, therefore, reduced deaths and comorbidities associated with this surgery. The eosinophil count is one of the inflammatory markers less studied in the literature, regarding the gastrointestinal tract. However, there is an increased interest in the study of this marker, and there are already promising results in other gastrointestinal pathologies. The aim of this study is to review the total postoperative eosinophil count in a random group of patients undergoing CRC and how this count may be predictive of a higher risk of anastomotic leakage. For this review, authorizations were required from the Ethics Committee and the Board of Directors of Centro Hospitalar Universitário de Lisboa Central (CHULC), as well as the collection and construction of a database

O papel dos heparano-sulfatos nas infeções víricas

Trabalho Final do Curso de Mestrado Integrado em Medicina, Faculdade de Medicina, Universidade de Lisboa, 2023Os Proteoglicanos de Sulfato de Heparano (HSPG) encontram-se presentes tanto na membrana celular como na matriz extracelular (MEC), sendo libertados e mobilizados pela ação das metaloproteinases (MMPs) e da Heparanase (HPSE). Estes proteoglicanos caracterizam-se pela sua carga negativa (conferida pelo grupo Sulfato de Heparano – HS) que lhes permite o sequestro de água e catiões (sódio e cálcio) e também pela capacidade de se ligarem a uma grande variedade de moléculas (tais como, proteínas da matriz extracelular, fatores de crescimento, citocinas e quimiocinas, tendo também sido demonstrado que funcionam como correcetores celulares para um grande número de vírus) e assim regular diversas funções biológicas. Este trabalho tem como objetivo rever evidências do papel dos sulfatos de heparano nos mecanismos patogénicos das infeções víricas, com especial enfoque no vírus da hepatite C. Como exemplo baseámo-nos num estudo realizado no Laboratório de Genética da FMUL para tentar entender a influência de um polimorfismo funcional (rs4693608) do gene da HPSE na progressão para os estadios de fibrose, numa amostra populacional com hepatite C crónica (HCC). Identificou-se que a idade e as atividades séricas dos enzimas ALP, AST, ALT e GGT se encontravam mais elevadas e o número de plaquetas diminuído, nos estadios de fibrose mais elevados (F3/4). Na associação genótipo e fenótipo intermédio, houve uma relação deste polimorfismo com níveis mais elevados de IMC, GGT e RNA. Concluindo-se, assim, através dos resultados obtidos das associações entre o fenótipo intermédio e o fenótipo distante, e também do genótipo com o fenótipo intermédio, que este polimorfismo afeta a progressão da fibrose.Heparan sulfate proteoglycans (HSPG) are present both in the cell membrane and in the extracellular matrix (ECM), being released and mobilized by the action of metalloproteinases (MMPs) and heparanase (HPSE). These proteoglycans are characterized by their extreme negative charge (conferred by the heparan sulfates - HS) which allows them to sequester water and cations (sodium and calcium), and also by their ability to bind to a wide variety of molecules (such as, extracellular matrix proteins, growth factors, cytokines and chemokines, and also serve as cellular correctors for a wide variety of viruses) and thus regulate diverse biological functions. This work aims to review evidence of the role of heparan sulfates in the pathogenic mechanisms of viral infections, with a special focus on the hepatitis C virus (HCV).We used a study conducted at the Laboratory of Genetics of FMUL as an example, which aims to understand the influence of the HPSE gene functional polymorphism (rs4693608) in the progression to fibrosis stages in chronic hepatitis C individuals. In the higher stages of fibrosis (F3/4), we observed that the age and the serum activities of hepatic enzymes (ALP, AST, ALT and GGT) were higher, and the number of platelets was lower. There was also an association between genotype and intermediate phenotype with the aforementioned polymorphism and higher levels of BMI, GGT and viral load (viral RNA). Our results provide evidence for an association between intermediate and distant phenotypes, and also between genotype and intermediate phenotype, leading us to conclude that the polymorphism investigated here affects the progression of fibrosis

Efeito placebo em pediatria

Trabalho Final do Curso de Mestrado Integrado em Medicina, Faculdade de Medicina, Universidade de Lisboa, 2023Introdução: Os efeitos placebo e nocebo são fatores importantes nos ambientes terapêuticos e podem influenciar os resultados dos tratamentos. Compreender esses efeitos nas populações pediátricas é particularmente importante devido a possíveis diferenças em relação aos adultos e considerações éticas. Objetivo: Esta revisão sistemática teve como objetivo avaliar a magnitude dos efeitos placebo e nocebo na população pediátrica em várias condições clínicas. O objetivo principal foi comparar a resposta dos grupos placebo com a dos grupos de controlo sem tratamento em ensaios clínicos aleatorizados. Os objetivos secundários incluíram examinar a magnitude desses efeitos com base em diferentes tipos de resultados e explorar outras razões para variações no tamanho do efeito. Métodos: Realizou-se uma pesquisa para identificar estudos relevantes, com foco em ensaios clínicos aleatorizados envolvendo populações pediátricas. Vários tipos de resultados, incluindo reportados por participantes, por cuidadores e por médicos foram considerados. Foi realizada uma síntese dos dados e meta-análise para avaliar a magnitude do placebo. Resultados: A análise primária dos resultados dicotómicos incluiu um total de 2.106 participantes de 11 estudos. O risco relativo (RR) agrupado foi de 1,01 (IC 95%: 0,79 a 1,28). Para a análise de resultados contínuos, um total de 2.102 participantes de 24 ensaios foram incluídos. A diferença média padronizada (SMD) agrupada foi -0,15 (IC 95%: -0,27 a -0,02), indicando um pequeno efeito estatisticamente significativo favorável ao grupo placebo. Não foram encontradas diferenças significativas nas análises secundárias com base no tipo de avaliação de resultado clínico. Conclusão: Esta revisão sistemática abordou a lacuna de conhecimento em relação aos efeitos placebo em populações pediátricas. Ao sintetizar as evidências disponíveis, avaliar a magnitude desses efeitos e explorar os seus determinantes, contribuímos para a compreensão da resposta ao placebo em ensaios pediátricos. Esse conhecimento tem implicações para otimizar os ensaios clínicos pediátricos e garantir considerações éticas na assistência pediátrica.Background: Placebo and nocebo effects are important factors in therapeutic environments and may influence treatment outcomes. Understanding these effects in pediatric populations is particularly crucial due to potential differences from adults and ethical considerations. Objective: This systematic review aimed to assess the magnitude of placebo and nocebo effects in the pediatric population across various clinical conditions. The primary objective was to compare the response in placebo groups with that of no-treatment control groups in randomized clinical trials. Secondary objectives included examining the magnitude of these effects based on different outcome types and exploring other reasons for variations in effect size. Methods: A comprehensive search was conducted to identify relevant studies, focusing on randomized clinical trials involving pediatric populations. Various outcome measures, including patient-reported, observer-reported, and clinician-reported outcomes, were considered. Data synthesis and meta-analysis were performed to assess the magnitude of placebo. Results: The primary analysis of dichotomous outcomes included a total of 2,106 participants from 11 studies. The pooled risk ratio (RR) was calculated as 1.01 (95% CI: 0.79 to 1.28). For the analysis of continuous outcomes, a total of 2,102 participants from 24 studies were included. The pooled estimate for the standardized mean difference (SMD) was -0.15 (95% CI: -0.27 to -0.02), indicating a small statistically significant effect favouring the placebo treatment group. We found no significant differences in the secondary analyses based on the type of clinical outcome assessment. Conclusion: This systematic review addressed the knowledge gap regarding placebo effects in pediatric populations. By synthesizing the available evidence, evaluating the magnitude of these effects, and exploring their determinants, we have contributed to the understanding of the placebo response in pediatric trials. This knowledge has implications for optimizing pediatric clinical trials and ensuring ethical considerations in pediatric healthcare

Current picture of anaplastic thyroid carcinoma : a review of literature

Trabalho Final do Curso de Mestrado Integrado em Medicina, Faculdade de Medicina, Universidade de Lisboa, 2023O carcinoma anaplásico da tiróide (CAT) é uma neoplasia rara que correspondente a 1-2 % de todas as neoplasias da tiróide. Dada a sua raridade, a sua verdadeira incidência não é totalmente conhecida, mas prevê-se que seja entre 1-2 casos por milhão de habitantes por ano. Enquanto a incidência do cancro da tiróide tem vindo a aumentar, não é claro se a incidência do CAT tem sofrido alterações durante o mesmo período, no entanto, parece existir uma tendência global para a sua diminuição. O CAT é um dos tumores sólidos mais agressivos em humanos, apresentando um péssimo prognóstico, correspondente até 50% de todas as mortes atribuídas ao cancro da tiróide, com uma sobrevivência global média que varia entre 3 e 6 meses. Este carcinoma ocorre mais frequentemente em mulheres e idosos e acredita-se que o bócio de longa data seja o fator de risco mais importante. Outros fatores de risco desta patologia incluem idade avançada, baixo nível de escolaridade, carcinoma diferenciado da tiróide, obesidade e IMC elevado e história de exposição a radiação. Os fatores com um bom valor prognóstico incluem idade mais jovem, menor número de comorbilidades, tumores N0 e M0, doença primária confinada à tiróide, tumores de pequeno tamanho (≤ 6 cm) e margens cirúrgicas negativas. Os fatores de mau prognóstico incluem idade avançada, história de exposição à radiação, presença de hipercalcemia ou leucocitose, maior extensão tumoral, presença de metástases à distância, expressão de p53 e sexo masculino. Na maioria dos casos, o CAT apresenta-se como um crescimento rápido de uma massa tiroideia que facilmente invade os órgãos adjacentes. Os sintomas mais comuns devem-se à compressão das estruturas cervicais, causando disfagia, alterações da voz e/ou rouquidão, estridor e tosse, podendo também surgir sintomas constitucionais. Cerca de 50% dos doentes apresentam-se inicialmente com doença metastática e outros 25% irá desenvolvê-la ao longo da história natural da doença. Os locais mais comumente afetados são, por ordem decrescente, o pulmão e pleura, osso e cérebro. O CAT não tem um marcador tumoral associado. Na ausência de tratamento, a principal causa de mortalidade é a asfixia causada diretamente pela invasão das vias respiratórias pelo tumor. Relativamente ao estadiamento, todos os CAT são classificados como estadio IV, dada a sua agressividade, e encontram-se subdivididos em 3 grupos: o estadio IVA corresponde a doença intra-tiroideia, sem doença nodular ou metástases; o estadio IVB corresponde inclui doença intra-tiroideia com doença nodular ou doença extra-tiroideia com ou sem envolvimento nodular; já o estadio IVC engloba todos os doentes com metástases à distância, independentemente do T ou N. O diagnóstico definitivo depende da confirmação citológica ou histológica, assim como da exclusão de outras causas com um prognóstico mais favorável. Na maioria dos casos, o diagnóstico correto é possível através da citologia aspirativa com agulha fina; no entanto, em alguns casos, pode ser necessária biópsia por punção ou, mais raramente, uma biópsia aberta. O recurso a procedimentos ecoguiados permite a identificação de áreas mais adequadas para a colheita de amostras. Ao exame microscópico, o CAT apresenta uma morfologia altamente maligna com áreas marcadas de necrose e inflamação do estroma, sem evidência da normal arquitetura tiroideia. Uma característica interessante é a íntima relação que o tumor estabelece com macrófagos, que formam uma densa rede semelhante à microglia, e asseguram propriedades pró-tumorigénicas que contribuem para a resistência ao tratamento e pior prognóstico. Os principais tipos histológicos encontrados são a morfologia sarcomatóide, de células gigantes pleomórficas e epitelioide. As células anaplásicas da tiróide são normalmente negativas para proteínas específicas da tiróide (tiroglobulina) e para marcadores da linhagem tiroideia (TTF-1). Em contrapartida, são normalmente positivas para PAX-8 e citoqueratinas, o que valida a sua origem folicular. A coloração positiva para p53 e mutações BRAF, especialmente BRAF V600E, apoiam este diagnóstico. A avaliação imagiológica é crucial para o estadiamento do tumor e fornece informações importantes sobre o prognóstico e o tratamento. A ecografia permite uma avaliação rápida do tumor primário, a sua extensão e invasão, assim como o envolvimento das cadeias nodulares. O estadiamento inicial do tumor deve incluir TAC com contraste do pescoço, tórax, abdómen e pélvis, no entanto, a RM com gadolínio é uma boa alternativa. 18FDG PET-TC é o melhor método para avaliar a existência de metástases à distância. Todos os doentes com diagnóstico de CAT devem ser submetidos a uma avaliação completa da via aérea com laringoscopia de fibra óptica, durante a sua avaliação inicial. Esofagogastroduodenoscopia e/ou a broncoscopia podem ser consideradas para visualizar a invasão direta do tumor nesses órgãos. Os diagnósticos diferenciais mais importantes incluem outros carcinomas primários ou metastáticos que afetam a tiroideia, assim como condições benignas como a tiroidite aguda e a tiroidite de Riedel. Dentro dos carcinomas da tiróide, o ATC apresenta o maior número de mutações. A perda de expressão dos marcadores de diferenciação da tiroideia é uma característica distintiva desta neoplasia. Alterações genómicas frequentes incluem mutações inativadoras do TP53 e mutações ativadoras do TERT, BRAF e RAS. Mutações do TP53 e TERT são sugestivas de serem um evento tardio na carcinogénese e essenciais para a transformação anaplásica. A mutação BRAF V600E é a alteração BRAF mais frequente e as mutações BRAF e RAS são mutuamente exclusivas. Pensa-se que ambas são driver mutations que ocorrem precocemente no desenvolvimento tumoral. Outras alterações genómicas incluem a ativação e inativação de genes, alterações em vias de sinalização, rearranjos cromossómicos, fusões de genes, alterações do número de cópias e amplificações de genes, bem como modificações epigenéticas. Por este motivo, é recomendada a realização de testes moleculares em doentes com CAT, uma vez que os doentes podem ser encaminhados para terapias dirigidas. A verdadeira origem deste tumor ainda não foi identificada. No entanto, a maioria dos autores acredita que o CAT é originário de carcinomas bem-diferenciados que sofrem um processo de desdiferenciação através da aquisição de sucessivas alterações genómicas. Quando as células anaplásicas metastizam, sofrem um processo designado transição epitélio-mesênquima, em que mudam a expressão de genes do fenótipo epitelial (como a E-caderina, claudina e ocludina) para genes típicos do fenótipo mesenquimal (como a N-caderina, vimentina e catenina). Através de um processo inverso, as células são capazes de retornar ao seu fenótipo epitelial, dando início à formação de um tumor metastático num local secundário. A comunicação com os doentes, os seus familiares e prestadores de cuidados é extremamente importante. Os médicos devem discutir as opções terapêuticas, os riscos e benefícios dos procedimentos, e os potenciais resultados devem ser comunicados de forma realista. Cuidados de fim de vida e gestão da via aérea devem ser abordados precocemente, assim como a determinação dos objetivos, quer terapêuticos, quer paliativos. O tratamento deve ser decidido a nível individual, em conjunto com uma equipa multidisciplinar. Doentes em estadio IVA ou IVB podem ser candidatos a intervenção cirúrgica, devendo ser recomendada se for possível obter uma ressecção completa do tumor com uma morbilidade mínima. Alguns doentes em estadio IVC também podem ser elegíveis para cirurgia para controlo loco-regional da doença e intenção paliativa. Enquanto a maioria dos estudos afirma que a ressecção completa está associada a um prolongamento da sobrevida-livre-de-doença e da sobrevida global, uma revisão sistemática recente não encontrou qualquer diferença significativa na sobrevida dos doentes em função do tipo de ressecção, e margens negativas podem não apresentar benefícios para a sobrevida. As ressecções radicais são de benefício questionável e não são recomendadas. Os melhores resultados nos estadios IVA e IVB são alcançados através de ressecção cirúrgica completa/quase, completa, seguida de radioterapia, por vezes em associação com quimioterapia. Os estudos são consistentes com o facto de doses de radiação mais elevadas conduzirem a uma sobrevida prolongada, sendo doses mais baixas oferecidas para paliação. Radioterapia com modulação da intensidade é a técnica recomendada, uma vez que minimiza a exposição dos tecidos saudáveis circundantes à radiação. Relativamente aos doentes em estadio IVC, opções terapêuticas incluem quimioterapia citotóxica, com ou sem radioterapia, assim como abordagens imunoterapêuticas e terapias dirigidas, caso sejam detetadas mutações-chave. Infelizmente, a quimioterapia apresenta resultados dececionantes e acarreta uma elevada toxicidade e diminuição da qualidade de vida. Em raras exceções, a quimioterapia pode permitir a ressectabilidade em doentes com doença inicial irressecável. A traqueostomia não é recomendada por rotina e deve ser evitada, se possível, pois embora prolongue no imediato, está associada a uma diminuição da sobrevida a longo prazo. Dada a raridade deste tumor e do seu prognóstico preocupante, as diretrizes atuais da ATA recomendam que os doentes suficientemente saudáveis devem ser encorajados a participar em ensaios clínicos, numa tentativa de encontrar as melhores abordagens terapêuticas, tendo em conta a urgente necessidade de novos tratamentos. A mutação BRAF V600E, atualmente, é a que tem maior aplicabilidade no tratamento do CAT. O tratamento com drabafenib (inibidor BRAF) mais trametinib (inibidor MEK) para doentes com esta mutação tem mostrado resultados encorajadores e é recomendado quando esta é encontrada. Estudos atuais com outros fármacos mostram resultados satisfatórios e promissores, no entanto, é necessária mais investigação de forma a caracterizar melhor a sua segurança e eficácia.Anaplastic thyroid carcinoma (ATC) is a rare thyroid disease, corresponding to 1-2 % of all thyroid neoplasms. It’s one of the most aggressive solid tumors in humans and its responsible for up 50% of all deaths attributed to thyroid cancer with a median overall survival of 3-6 months. Thankfully, its incidence is thought to be decreasing globally. A longstanding goiter and age are important risk factors for the development of ATC. In the majority of cases, ATC presents as a rapid growth of a thyroid mass and its symptoms are mostly due to compression of cervical structures. Metastatic disease is very frequent and most commonly affects the lungs, pleura, bones, and brain. In the absence of treatment, most patients die from asphyxiation. The definitive diagnosis relies on cytologic, or histologic confirmation, and radiological studies are necessary to complete tumor staging and every patient should undergo a direct visualization of the airway during initial evaluation. All ATC cases are considered stage IV disease. ATC is thought to originate from well-differentiated carcinomas that undergo anaplastic transformation, and loss of expression of thyroid differentiation markers is a hallmark of this neoplasm. ATC has a high mutation burden and frequent genomic alterations include TP53, TERT, BRAF V600E and RAS mutations. Conversations about end-of-life care should be initiated early and goals of care should be determined. Therapies are done at the individual level together with a multidisciplinary team. Treatment options include surgery, if possible, radiotherapy and chemotherapy, the latter showing disappointing results. Recent therapies, like targeted therapies (in patients with targetable mutations) and immunotherapies have been showing satisfactory and promising results, however, more studies are needed. Tracheostomy is not routinely recommended and should be avoided. Patients should be encouraged to engage in clinical trials, considering the urgent need for new treatments

A atribuição de dignidade humana ao embrião in vitro : uma perspectiva jurídica critica

Esta tese explora a complexidade de se estabelecer o estatuto moral e jurídico do embrião humano fertilizado in vitro. A pesquisa é orientada pela pergunta central de se devemos ou não atribuir dignidade ao embrião humano in vitro. Nos deparamos com a incoerência que decorre dos subterfúgios para ao mesmo tempo proteger o embrião sob o manto da dignidade e permitir que seja destruído em pesquisas. A relevância do tema ultrapassa fronteiras nacionais em razão da fertilização in vitro (FIV) ser utilizada em quase todos os países do mundo como primordial mecanismo de solução dos problemas da infertilidade humana, além de produzir – mundialmente – inúmeros embriões excedentes criopreservados, sem definição consensual acerca de seu estatuto jurídico. A partir de um estudo interdisciplinar com a contextualização dos principais termos e conceitos como vida, pessoa e dignidade, a nossa contribuição para o conhecimento e discussão cientifica no âmbito jurídico-político é admitir que o embrião in vitro não está acobertado pela dignidade humana e atribuir a natureza jurídica análoga a de aglomerado celular, material biológico ou, propriamente de coisa, até que tenha potencial ativo. Isso não impede que o uso que pode ser feito dele, seja controlado. O método fundamental de investigação é o hermenêutico. O trabalho busca fontes em diversos ramos do conhecimento como a biologia, medicina, biotecnologia, filosofia e o direito. Fez-se necessário percorrer tais disciplinas, porque o foco do problema que nos propusemos a investigar está no início da vida. Um conceito indecifrável, mas que pode ser analisado sobre diferentes perspectivas. Em particular, quando se busca compreender as diversas fases do desenvolvimento embrionário e, ao mesmo tempo, examinar as teorias filosóficas para chegar ao início moralmente relevante da vida do ponto de vista jurídico. Analisamos os argumentos éticos e jurídicos a favor e contra a utilização de embriões em pesquisas e como as legislações de diversos países se enquadram nesses posicionamentos. Buscou-se estabelecer a correlação do tratamento jurídico do embrião com a religião, valores culturais e com o histórico eugênico que marcou o passado recente, em especial, na Alemanha nazista.This thesis explores the complexity of establishing the moral and legal status of the in vitro fertilized human embryo. The research is guided by the central question whether or not to assign dignity to the in vitro human embryo. We encounter an incoherence that derives from subterfuge to at the same time protect the embryo under the cloak of dignity, while allowing it to be destroyed in research. The relevance of the research goes beyond national boundaries because in vitro fertilization (IVF) is used in almost every country in the world as the primary mechanism for solving the problems of human infertility, besides producing - worldwide - many cryopreserved surplus embryos, without consensual definition about their legal status. Performing an interdisciplinary study including a contextualization of the main terms and concepts such as life, person and dignity, our contribution to knowledge and scientific discussion in the legal-political context is to admit that the in vitro embryo is not covered by human dignity and to attribute the legal nature analogous to that of a cell cluster, biological material or a proper thing, until it has active potential. This does not prevent that the use it can be made of, to be controlled. The fundamental method of investigation is the hermeneutic. The work seeks sources in various branches of knowledge such as biology, medicine, biotechnology, philosophy and law. It was necessary to go through these disciplines, because of the research focus, early human life, an indecipherable concept, but one that can be analyzed from different perspectives. In particular, when seeking to understand the various stages of embryonic development and, at the same time, to examine philosophical theories in order to arrive at the morally relevant beginning of life from a legal standpoint. We analyze the ethical and legal arguments for and against the use of embryos in research and how the laws of many countries fit into these positions. We sought to establish the correlation of the embryo's legal treatment with religion, cultural values and the eugenic history that marked the recent past, especially in Nazi German

Avaliação do impacto de uma alimentação rica em quinoa, pescado e óleo de peixe no perfil lipídico e acumulação de DHA no fígado de murganhos com propensão para desenvolver doença de Alzheimer

Dissertação de Mestrado Integrado em Medicina Veterinária, na área científica de Morfologia e FunçãoA doença de Alzheimer (AD) é uma doença neurodegenerativa que resulta na diminuição das funções cognitivas. Dada a forte correlação entre a AD e níveis neuronais reduzidos de ácido docosahexaenóico (DHA), o enriquecimento do cérebro por via nutricional pode contribuir para o abrandamento do declínio cognitivo. Considerando a relevância do fígado no metabolismo lipídico, este estudo teve como objetivo avaliar o impacto de uma alimentação rica em DHA no perfil lipídico e acumulação deste ácido gordo no fígado de murganhos. Deste modo, 32 murganhos transgénicos 5xFAD (modelo animal para a AD) foram divididos em quatro grupos. Cada grupo foi alimentado com uma dieta diferente: Controlo (C) (dieta padrão AIN-93M); Cavala (CV) (AIN-93M suplementada com 10% cavala); Quinoa (Q) (AIN-93M com 5% quinoa); e Cavala+Quinoa (CVQ) (AIN-93M com 10% cavala e 5% quinoa). A fração lipídica hepática destes murganhos foi caracterizada em termos do teor de lípidos totais, perfil de classes de lípidos, e distribuição de ácidos gordos nos lípidos totais e nas classes de lípidos mais relevantes. Assim, se as diferentes dietas não impactaram o teor de lípidos totais, no que se refere ao perfil das classes de lípidos, verificou-se que os grupos CV e CVQ registaram tendencialmente (p<0,05) maiores teores relativos de fosfolípidos (27,6 ± 5,9% e 29,9 ± 5,0% dos lípidos totais, respetivamente) e de 1,3-diacilgliceróis+colesterol (15,9 ± 2,5% e 14,0 ± 2,8%). Em contrapartida, o grupo Q distinguiu-se com os maiores níveis de triacilgliceróis (TAG), com cerca de 37,5 ± 6,9%. Os grupos Q (15,9 ± 2,7%) e CVQ (15,5 ± 2,9%) registaram uma diminuição dos ácidos gordos livres (FFA) face ao grupo C (22,6 ± 6,7%). A adição da cavala às dietas resultou na redução dos ácidos gordos polinsaturados n-6, e no aumento dos ácidos gordos saturados e polinsaturados n-3. Este último grupo foi impulsionado pelo ácido eicosapentaenóico (EPA) e, em particular, pelo DHA, cujos teores se destacaram nos grupos CVQ (12,2 ± 2,8%) e CV (7,9 ± 3,3%). Quanto ao perfil de ácidos gordos das principais classes de lípidos, as maiores diferenças foram registadas nos FFA e TAG, cujos teores de DHA foram mais elevados nos grupos CV (2,9 ± 1,2% e 7,5 ± 3,6%, respetivamente) e CVQ (3,0 ± 1,0% e 8,2 ± 2,1%, respetivamente). Assim, os resultados apontam para um possível benefício na adição de quinoa à cavala com aumento de DHA nos teores hepáticos. A suplementação permitiu uma maior disponibilidade de DHA sob a forma livre e, como tal, disponível para ser transportado ou incorporado noutras classes de lípidos, sugerindo uma incorporação de DHA excedente nos TAG em resposta à suplementação com cavalaABSTRACT - Evaluation of the impact of a diet rich in quinoa, fish, and fish oil on lipid profile and accumulation of DHA in the liver of mice prone to developing Alzheimer's disease - Alzheimer's disease (AD) is a neurodegenerative disease that results in a decrease in cognitive function. Given the strong correlation between AD and reduced neuronal levels of docosahexaenoic acid (DHA), brain enrichment through nutrition may contribute to slowing cognitive decline. Considering the liver's relevance in lipid metabolism, this study aimed to evaluate the impact of a DHA-rich diet on lipid profile and accumulation of this fatty acid in the mouse liver. Therefore, 32 5xFAD transgenic mice (animal model for AD) were divided into four groups, and each of these groups was fed different diets: Controlo (C) (standard AIN-93M diet); Cavala (CV) (AIN-93M supplemented with 10% chub mackerel); Quinoa (Q) (AIN-93M with 5% quinoa); and Cavala+Quinoa (CVQ) (AIN-93M with both 10% chub mackerel and 5% quinoa). The hepatic lipid fraction of these mice was characterized in terms of total lipid content, lipid class profile, and fatty acid distribution in total lipids and in the most relevant lipid classes. While the different diets did not impact total lipid content, regarding lipid classes, it was found that groups CV and CVQ tended to have higher relative levels of phospholipids (27.6 ± 5.9% and 29.9 ± 5.0% of total lipids, respectively) and 1,3-diacylglycerols+cholesterol (15.9 ± 2.5% and 14.0 ± 2.8%, respectively). On the other hand, group Q stood out with the highest levels of triacylglycerols (TAG), at approximately 37.5 ± 6.9%. Groups Q (15.9 ± 2.7%) and CVQ (15.5 ± 2.9%) showed a decrease in free fatty acids (FFA) when compared to C group (22.6 ± 6.7%). The addition of chub mackerel to the diets resulted in a reduction of n-6 polyunsaturated fatty acids and an increase in saturated fatty acids and n-3 polyunsaturated fatty acids. The increment perceived in the latter group was driven by eicosapentaenoic acid and, particularly, DHA, which stood out in groups CVQ (12.2 ± 2.8%), and CV (7.9 ± 3.3%). As for the fatty acid profile of the main lipid classes, the largest differences were observed in FFA and TAG, with higher levels of DHA in groups CV (2.9 ± 1.2% and 7.5 ± 3.6%, respectively) and CVQ (3.0 ± 1.0% and 8.2 ± 2.1%, respectively). Therefore, these results suggest a potential benefit in adding quinoa to chub mackerel to increase DHA levels in the liver. Supplementation also allowed for greater availability of free DHA, which can be transported or incorporated into other lipid classes, even suggesting an incorporation of DHA in excess into TAG in response to chub mackerel supplementationN/